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国家高技术研究发展计划(863计划),国家重点基础研究发展计划(973计划,含重大科学研究计划)都是国家相对超级高端的研究项目。
但凡想要拿到其中一个,都需要足够的积累。
当然,但凡能够拿到一个,也能让人功成名就,几百万的课题经费是小菜一碟,数千万的科研基金,也是很常见的。
而这样的一个项目启动资金,是袁威宏目前拿下的青年基金的百倍有余。
再要说什么的时候,外面做完检查复诊的病人,已经推开门。
袁威宏就不再说话,方子业也是赶紧开始薅自己的学识点,一步一步地进行阅片审视,精准诊断并用药,然后得到了0.9的学识点。
美滋滋地开心起来。
因为即便是中南医院,也不是那种疑难杂症遍地走的,疑难杂症自然不少,可也有简单的病种,病人挂号的时候,可不会考虑浪费资源这样的说法。
门诊完,方子业就又得到了15点左右的学识点,这一下,即便是加点打结术到了3级,给老师送礼物。
学识点的余额,一下子又累积到了60之多,还可以增加一個3级技能的同时,今天晚上,方子业还有细胞实验,即将收获,到时候观察结果,肯定又是一笔不菲的学识点。
“师父,我先放白大褂,然后去实验室了啊!”
“好,WB好好跑。”袁威宏交待,仿佛是在给方子业暗示,方子业在做什么,他都了然于心。
方子业点了点头,加快了脚步。
做实验、搞钱、发文章、学识点,充实且快乐。
WB是缩写,蛋白质免疫印迹(WesternBlot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。
一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。方子业研究的HK2,其实就是生物化学糖酵解过程中的第一个限速酶己糖激酶,而HK2则是己糖激酶的缩写,己糖激酶是催化己糖使之磷酸化的酶,它是糖酵解途径的第一个酶,也是糖酵解途径的绝对限速酶。
众所周知,糖酵解是糖转化为能量的第一步,没有糖酵解的第一步,葡萄糖和果糖想要被正常利用,是几乎不可能的事情,而如果依靠酮体等旁路作为有氧氧化的底材,肯定无济于事。
因此定量检测HK2的含量,在骨巨细胞瘤经过过表达、沉默后的绝对数量,是检测HK2在骨巨细胞瘤发展过程中作用的一个定量证据。
WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分……
原理听起来颇为复杂,但其实真正要操作的时候,主要的步骤主要是以下几步。
试剂准备,也就是让蛋白质跑的跑道,需要聚丙烯酰胺凝胶电泳来提供。
然后是参赛的运动员,是把肿瘤细胞裂解之后,使得内部的蛋白质充分释放,然后制作了标准曲线。
制作标准曲线之后,就可以让自己处理的细胞产生的‘运动员’开始上赛道了。
紧接着是电泳、转模、免疫反应、显影等等一系列后,通过特殊的抗体和试剂,就能够显示目标蛋白的胶片。……
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